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混合模式分离，选择性有多独特？

2022-06-24

混合模式色谱柱可被认为是疏水性的离子交换剂——相对于亲水性更强的用于传统的IEC（离子交换色谱）色谱柱。常用的混合键合相有三种模式：反相/阴离子交换、反相/阳离子交换、反相/两性物质。结果是这类色谱柱同时表现出RPC（反相色谱）和IEC的行为。使用混合模式的起因是，与RPC或IEC柱相比，他们具有独特的选择性。

混合键合相的优势有：

1	高选择性，可提供与反相及离子交换不同的选择性；
2	流动相无需使用离子对试剂即可分离强极性物质；
3	可以同时分析分离不同类型的化合物（带正电、负电和中性物质）；
4	可直接进行质谱分析。

混合模式分离的保留行为能通过改变B%、pH、缓冲盐或盐的浓度控制。

月旭现有的混合模式色谱柱有：

微信截图_20220624141133.png

Ultimate^® NH₂/CN键合相，新柱的保存溶剂是正己烷-异丙醇。当作为反相模式使用时：做样流动相中含有甲醇、乙腈、水等极性溶剂，活化方式如下：

微信截图_20220624141144.png

微信截图_20220624141152.png

当色谱柱使用一段时间后，出现压力升高、峰形异常、柱效降低、分离度下降等异常情形时，先用过渡流动相冲洗掉色谱柱中的缓冲盐，再按照如下方式冲洗（建议反冲）：

微信截图_20220624141320.png

Ultimate^®C18/SCX、Ultimate^® SCX/C18键合相，新柱的保存溶剂是甲醇/水。活化方式如下：

微信截图_20220624141358.png

当色谱柱出现柱压升高、峰形异常、柱效降低、分离度下降等异常后，先使用过渡流动相冲洗掉色谱柱中的缓冲盐，再按照如下方式冲洗，其中，如果流动相中使用了离子对试剂，需先用50%甲醇冲洗后，再按照下表冲洗（建议反冲）：

微信截图_20220624141429.png

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