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何首乌中黄曲霉毒素的检测

2022-06-23

何首乌(学名:Fallopia multiflora (Thunb.) Harald.),又名多花蓼、紫乌藤、夜交藤等。是蓼科蓼族何首乌属多年生缠绕藤本植物,块根肥厚,长椭圆形,黑褐色。生山谷灌丛、山坡林下、沟边石隙。产陕西南部、甘肃南部、华东、华中、华南、四川、云南及贵州。其块根入药,可安神、养血、活络,解毒(截疟)、消痈;制首乌可补益精血、乌须发、强筋骨、补肝肾,是常见贵细中药材。但是在存储的过程中容易被真菌毒素污染,故需要对其检测。药典上尚未收载,基体干扰较大,月旭的免疫亲和小柱能很好的净化。


免疫亲和柱:Welchrom® Aflatoxin B1、B2、G1、G2。

规格:3mL,15/pk。

前处理

称取2g样品于离心管中,加入10mL 70%甲醇水,涡旋2min,超声15min,6000r/min离心5min,移取2mL+15mLPBS溶液,混匀,用玻璃滤纸过滤,备用。

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常规过柱、净化方式

备用溶液全部通过免疫亲和柱,速率1s/滴,10mL PBS淋洗,抽干,1mL甲醇浸泡1min,收集全部甲醇溶液,混匀,上机。

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常规的净化方式,并不能洗脱所有杂质,而且这些杂质会显著影响黄曲霉B1、B2、G1、G2的出峰,且无法通过改变色谱条件来实现分离。

淋洗液添加吐温20的净化方式

备用溶液全部通过免疫亲和柱,速率1s/滴,10mL吐温20PBS淋洗,抽干,1mL甲醇浸泡1min,收集全部甲醇溶液,混匀,上机。

微信截图_20220623140309.png

上图中为添加了1%、2%、4%、10%的吐温20PBS淋洗液。从图谱结果来看,4中添加量的吐温20PBS溶液都同样起到了显著的净化效果。如果用免疫亲和柱法来检测其他样品基质中的黄曲霉毒素时出现类似的干扰情况,也可以尝试用不同浓度的吐温20淋洗,以达到净化的目的。

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