2020-08-12
黄曲霉毒素(AFT)是一类真菌(如黄曲雷和寄生曲霉)的有毒的代谢产物,其衍生物有约20种,分别命名为B1、B2、G1、G2、M1、M2、GM、P1、Q1、毒醇等,其中以B1的毒性更大,致癌性更强。(欢迎索取纸质数据。)
黄曲霉毒素主要存在于药材、谷物、坚果、棉籽以及动物饲料相关的产品中。当人摄入量大时,可发生急性中毒,出现急性肝炎、出血性环死、肝细胞脂肪变性和胆管增生。当微量持续摄入,可造成慢性中毒,生长障碍,引起纤维性病变,致使纤维组织增生。
各级食品药品监管部门不断加大中药生产流通监管力度,努力保持中药质量总体稳定。
色谱条件
色谱柱:月旭Ultimate® ODS-3 (4.6×300mm,5μm);
流动相:甲醇/乙腈/水=300/220/480;
柱温:30℃;
检测波长: 激发波长:360nm,
发射波长:450nm;
衍生方法:光化学衍生;
流速:0.8mL/min;
进样量:25μl。
流动相的配置
流动相配制:精密量取甲醇300ml、乙腈220ml、超纯水480ml,充分混匀后经0.45 μm滤膜抽滤,即得。
样品溶液的制备
标准储备液:精密量取黄曲霉毒素混合对照品溶液(黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2标示浓度分别为1.0μg/ml、0.3μg/ml、1.0μg/ml、0.3μg/ml)1ml,置于20ml容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,作为标准储备液,摇匀,备用。
混合对照品溶液:精密量取标准储备液1ml,置于25ml容量瓶,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。
供试品溶液:取供试品粉末15g,精密称定,置于均质瓶中,加入氯化钠3g,精密加入70%甲醇75ml。高速搅拌2分钟(搅拌速度大于11000r/min);离心5分钟(离心速度4000 r/min),精密量取上清液15ml,置于50ml容量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,离心10分钟(4000 r/min),精密量取上清液20ml,通过月旭Welchrom®黄曲霉毒素免疫亲和小柱,流速3ml/min,用20ml水洗脱,弃去洗脱液,使空气进入柱子,再用1.5ml甲醇洗脱,收集洗脱液,置于2ml容量瓶,加甲醇稀释至刻度,摇匀,用微孔滤膜过滤,取续滤液,即得。
标准曲线的绘制
分别精密吸取上述混合对照品溶液5μl、10μl、15μl、20μl、25μl注入液相色谱仪,测定峰面积。以进样量为横坐标,峰面积为纵坐标绘制标准曲线。
结果汇总
中药中黄曲霉毒素测定结果汇总
中药 品种 | 加标水平 | 加标回收率(%) | |||
G2 | G1 | B2 | B1 | ||
柏子仁 | B1: 1.0μg/kg B2: 0.3μg/kg G1: 1.0μg/kg G2: 0.3μg/kg | 90.24 | 95.67 | 96.70 | 88.94 |
薏米 | 115.55 | 107.62 | 113.91 | 91.83 | |
槟榔 | 82.03 | 82.26 | 92.86 | 83.64 | |
炒麦芽 | 93.48 | 94.10 | 97.54 | 86.07 | |
大枣 | 97.71 | 106.45 | 109.86 | 103.66 | |
地龙 | 100.63 | 108.59 | 114.85 | 101.98 | |
莲子 | 103.03 | 112.80 | 112.64 | 106.15 | |
胖大海 | 80.42 | 97.10 | 98.06 | 92.55 | |
全蝎 | 84.51 | 84.83 | 80.69 | 81.11 | |
酸枣仁 | 102.12 | 110.54 | 110.29 | 103.47 | |
蜂房 | 105.65 | 109.05 | 96.05 | 111.00 | |
使君子 | 80.75 | 83.25 | 67.74 | 78.59 | |
桃仁 | 104.66 | 104.33 | 108.96 | 108.23 |