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制备谱图峰分叉?我们有办法,不用怕!

2019-05-05

大家好,我们的答疑解惑板块好久不见咯~

小编更近收到了许多关于制备柱使用维护的一些问题,今天小编就整理了几个大家提问频率比较高的,比如:制备谱图中出现峰分叉、流速的压力、填料耐压多少以及使用等方面的问题,并邀请来2024欧洲杯买球app的技术工程师来为大家解答。一起来看看吧~

Q1制备谱图中出现峰分叉,可能有哪些原因,该怎么办?

峰分叉又称为裂峰,有可能是色谱柱以外的色谱条件发生了变化,或者色谱柱本身受损发生了变化。

A、样品浓度较高,上样量较大,导致峰分叉;只需要减少上样量即可。

B、色谱柱柱头被污染引起的峰分叉;使用合适的溶剂冲洗色谱柱。

C、柱压太高致使柱头塌陷引起峰分叉;在柱头端增补填料或者更换新色谱柱。

D、溶解样品的强度比流动相强,溶剂效应引起峰分叉;使用流动相溶解样品即可。

E、固体颗粒堵塞分配器,分配不均匀导致峰分叉;更换柱头端分配器即可。

Q2我要单次上样0.5-1g样品,请问我该用什么制备柱?

建议使用30*250mm或者50*250mm的制备柱。化药可以按照每100g填料可以上样1g样品的方法进行简单的计算,得到应该使用多大的制备柱或者相应的填料量。多肽样品由于自身的特殊性,纯化同样质量的样品,需要更多的填料。一般认为多肽样品100g填料可以上样0.1g样品。

Q3我购买了一根Ultimate  XB-C18,5um,21.2*250mm,请问该柱的流速、压力是多少?

正常情况下,21.2mm色谱柱的z佳流速20mL/min。我们公司该色谱柱出厂使用甲醇:水=75;25测试,压力为15Mpa。其他型号的制备柱流速可以参考下表。

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Q4我要装填DAC,请问你们的填料耐压是多大的?会不会导致填料压碎?

DAC装填时,为了确保填料不被压碎,需要在填料能够承受的压力范围内装填。月旭色谱填料采用特殊的加工处理工艺,使填料耐压性能更好,有利于DAC的装填。填料的耐压情况参考下表:

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